Rev. Peru. Investig. Agropecu. 1(1), e9
ISSN: 2955-8530
e-ISSN: 2955-831X
DOI: 10.56926/repia.v1i1.9
©Universidad Nacional Autónoma de Alto Amazonas
Artículo Original / Original Article
Recibido: 05/01/2022
Aceptado: 25/03/2022
Publicado: 20/04/2022
*Marco Antonio Mathios-Flores - mmathios@unaaa.edu.pe (autor de correspondencia)
Los autores. Este es un artículo de acceso abierto,
distribuido bajo los términos de la Licencia Creative
Commons Atribución 4.0 Internacional
Aislamiento e identificación de nematodos
entomopatógenos nativos en diferentes sistemas de
uso del suelo en Yurimaguas
Isolation and identification of native entomopathogenic nematodes
in different land use systems in Yurimaguas
Marco Antonio Mathios-Flores1* ; Beto Pashanasi-Amasifuen1; Analy Nohely Aponte-Jaramillo1;
Jesús Guillermo Alcázar-Sedano 1 ; Luis Alejandro Saire-Quispe 1
1Universidad Nacional Autónoma de Alto Amazonas, Yurimaguas, Perú
RESUMEN
Dentro las comunidades bióticas los nematodos son importantes indicadores ambientales de conservación de los sistemas
de suelo agrario. El objetivo del estudio fue aislar e identificar nematodos en 10 sistemas de uso del suelo del distrito
Yurimaguas, Perú. La recolección de muestras de cada sistema de suelo fue aleatoria, 10 muestras de suelo, recogidas de
un aproximado de 15 cm de profundidad, posteriormente se realizó el aislamiento de las muestras en recipientes
esterilizados, donde se dividió en dos submuestras para la colocación de 5 a 10 larvas de polillas (
G. mellonella
), las cuales
fueron conservados en ambientes de 20 a 25 °C por una semana; posterior al periodo de incubación se evaluó la presencia
de nematodos entomopatógenos. Se encontró la presencia de nematodos del género
Heterorhabditis
y
Steinernema
en
sistemas de uso de suelo de cultivos de cacao (
Theobroma cacao
L.), yuca (
Manihot esculenta
) y plátano (
Musa paradisiaca
).
El estudio de identificación de los nematodos entomopatógenos nativos en los diferentes usos del suelo de Yurimaguas
contribuye como propuesta para el control biológico de plagas en los cultivos de importancia económica.
Palabras clave: control biológico;
Heterorhabditis
; sistema de suelo agrario;
Steinernema
ABSTRACT
Within biotic communities, nematodes are important environmental indicators of conservation of agricultural soil systems.
The objective of the study was to isolate and identify nematodes in 10 land use systems of the Yurimaguas district, Peru.
The collection of samples from each soil system was random, 10 soil samples, collected from an approximate depth of 15
cm, later the isolation of the samples was carried out in sterilized containers, where they were divided into two subsamples
for the placement of 5 to 10 moth larvae (
G. mellonella
), which were kept in environments between 20 and 25 °C for one
week; After the incubation period, the presence of entomopathogenic nematodes was evaluated. The presence of
nematodes of the genus
Heterorhabditis
and
Steinernema
was found in land use systems of cocoa (
Theobroma cacao
L.),
cassava (
Manihot esculenta
) and plantain (
Musa paradisiaca
) crops. The identification study of native entomopathogenic
nematodes in the different land uses of Yurimaguas contributes as a proposal for the biological control of pests in crops
of economic importance.
Keywords: biologic control;
Heterorhabditis
; agrarian soil system;
Steinernema
Cómo citar / Citation: Mathios-Flores, M. A., Pashanasi-Amasifuén, B., Aponte-Jaramillo, A. N., Alcázar-Sedano, J. G. & Saire-Quispe, L. A.
(2022). Aislamiento e identificación de nematodos entomopatógenos nativos en diferentes sistemas de uso del suelo en Yurimaguas.
Revista Peruana de Investigación Agropecuaria. 1
(1), e9. https://doi.org/10.56926/repia.v1i1.9
2 Revista Peruana de Investigación Agropecuaria
Rev. Peru. Investig. Agropecu. 1(1): e9; (ene-jun, 2022)
1. INTRODUCCIÓN
Las comunidades bióticas del suelo representan aproximadamente el 25% de la diversidad global.
Entre la biota edáfica, los nematodos son considerados ecológicamente importantes como
indicadores ambientales (Varela Benavides, 2018), los nemátodos edáficos presentan características
biológicas y ecológicas que les convierten en excelentes indicadores del estado de conservación del
suelo en sistemas agrarios (Sánchez-Moreno & Talavera, 2013).
A fin de entender su distribución, prevalencia y usos posibles a nivel mundial, se realizaron varios
estudios de aislamientos e identificación en agroecosistemas como lo determinado por Islas-lópez
et al. (2021) obtuvieron tres aislamientos de nematodos con características de entomopatógenos, a
los cuales se les asignó el código de muestra TMA2, GMA6 y CGA7.
También, Paez Cuervo (2019) en Colombia identificó seis especies de nematodos codificados:
CPMsp1901, CPMsp1902, CPMsp1903, CPMsp1904, CPMsp1905 CPMsp1906; los cuales
correspondieron al género
Heterorhabditis
sp. Así mismo, López-Llano & Soto-Giraldo (2016)
encontraron 15 nematodos del género
Steinernema
y 6 del género
Heterorhabditi
.
Así mismo, en Trujillo, Maximiliano Orbegoso (2014) aisló dos poblaciones nativas de nematodos
entomopatógenos del género
Heterorhabditis
pertenecientes a la familia Heterorhabditidae, de un
total de 8 muestras de suelo y la multiplicación de nematodos entomopatógenos. Pacheco
Hernández et al. (2019), en Lambayeque aislaron dos cepas de nematodos entomopatógenos en el
cultivo de maíz que denominó M2 pues se recuperó en larvas de
Gallería mellonella
y la cepa que se
aisló del cultivo de mango la designó MH.
Según Sánchez Jara et al. (2019) el control de maleza y plagas en la agricultura, se basa en el uso de
plaguicidas químicos sin tener en cuenta los efectos adversos ecológicos; así como, en la salud animal
y humana. Por ello se buscan alternativas para el control de plagas de manera biológica por
nematodos entomopatógenos.
Ferrer Wurst (2021) indica que se disminuyeron los porcentajes de intensidad de infestación de 15%
hasta 1,68% en el área de la Azucarera río Turbio y se tuvo un beneficio/costo del control biológico
de 41,25 a 1, por ello en este estudio se los aíslan e identifican en diez sistemas de uso del suelo en
Yurimaguas, pues podrían ser útiles para los cultivos de la zona y usarse como agentes de control
biológico en el manejo de plagas ya que aportan positivamente en la mejora de las tierras para uso
agrícola. En el caso de
Steinernema
y
Heterorhabditis
son potentes agentes para el control biológico,
una vez que el juvenil infectivo logra penetrar al hemocel (Pacheco Hernández et al., 2019). El uso
de estos nematodos en el control biológico de plagas se debe orientar a controlar los insectos,
pretendiendo con esto disminuir la dependencia de los plaguicidas que causan problemas de
resistencia en los insectos (Basilio Agui, 2018).
2. MATERIALES Y MÉTODOS
La investigación se realizó en diferentes sistemas de uso de suelo del distrito de Yurimaguas que se
encuentra a 106 msnm, con una Superficie: 2,675 km², Temperatura: 26,7°C, viento del NO a 3 km/h,
humedad del 98%, Coordenadas: 5°54′00″S 76°05′00″O, con una precipitación anual de 1159 mm en
suelos no aluviales.
Mathios-Flores, M. A. et al. 3
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2.1. Técnicas e instrumentos de recolección de datos
Para la recolección de los nematodos entomopatógenos se utilizó el método de Kaya & Stock (1997).
2.2. Fase de campo: colección de muestras
Las muestras fueron tomadas al azar en cada uno de los sistemas de uso de suelo, un peso
aproximado de 10 kg de suelo. En cada sistema, se recolectó 10 muestras de suelo, hasta una
profundidad de 15 cm; el suelo colectado fue puesto en una bolsa de plástico rotulado. Después de
cada muestreo, se desinfectó la pala con alcohol de 70% para evitar la contaminación entre muestras
(Bertolotti & Cagnolo, 2019). Las muestras fueron procesadas inmediatamente después de la colecta.
2.3. Fase de laboratorio: Aislamiento de nematodos
Se usó la metodología de Kaya & Stock (1997), cada muestra de suelo fue homogenizada y colocada
en un recipiente de plástico previa desinfección, luego se dividió en 2 sub muestras distribuidas en
dos partes equitativas (se utilizó dos repeticiones por cada punto de muestreo) en cada sub muestra
de suelo se colocó 5 a 10 larvas de
G
.
mellonella
dependiendo de la disponibilidad de polillas.
Con las larvas en los recipientes, se cerraron herméticamente, luego se invirtió la posición de los
mismos para que se muevan y tengan mayor oportunidad de encontrarse con un juvenil infectivo.
Los recipientes fueron colocados en un ambiente de 20 a 25 °C hasta 1 semana para su observación.
Luego del periodo de incubación se evaluaron las muestras para verificar si hay larvas muertas con
síntomas de nematodos entomopatógenos.
Los insectos muertos con síntomas típicos de nematodos o sospechosos fueron colocados en
trampas White para su observación durante dos semanas aproximadamente, hasta la emergencia de
los nematodos.
2.4. Identificación
Las especies de nematodos entomopatógenos nativos se identificaron en el laboratorio de
Nematología de la Universidad Nacional Agraria La Molina.
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
El muestreo sistemático se realizó en cinco sectores de Yurimaguas donde se recolectaron 46
muestras de suelo en los meses de octubre a diciembre de 2021, en diferentes usos del suelo en los
que se encontraron nematodos entomopatógenos del género
Heterorhabditis
y
Steinernema
, como
se muestran en la Tabla 1, identificados por los cambios característicos en el color de los cadáveres
debido a la bacteria simbionte. Sin embargo, la identificación a nivel de especie fue por las
características morfológicas de juveniles aislados.
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Tabla 1
Ubicación de los nematodos en dos sistemas de uso del suelo
N° de
muestra
Cultivo
Nemátodos
entomopatógenos
Sector
Ubicación UTM
1
Cacao (
Theobroma cacao
L.)
Edad 3 años
Heterorhabditis y
Steinernema
INIA
Latitud 5056’23’’
Longitud 76070’12’’
41
Yuca (
Manihot esculenta
),
plátano (
Musa paradisiaca
),
cacao (
Theobroma cacao
L.)
Heterorhabditis y
Steinernema
INIA
Latitud 5056’91’’
Longitud 76007’105’’
En un proceso de aislamiento, Parada Domínguez et al. (2019) encontraron que el Steinernema
persistió más en suelo comparado con el de Heterorhabditis, muy similar a nuestros hallazgos.
A diferencia de Bustamante García (2020) que encontró siete géneros de nematodos fitoparásitos
asociados al cultivo de cacao, siendo estos:
Criconemoides, Helicotylenchus, Hemicycliophora,
Meloidogyne, Pratylenchus, Rotylenchus
y
Xiphinema
. De los cuales tres géneros benéficos:
Mononchus, Dorylaimus
y
Rhabditis
.
A continuación, se detalla las características morfológicas de géneros y especies de nematodos
entomopatógenos identificados:
3.1.
Género
Heterorhabditis
Machos
Los machos poseen una sola testis y un par de espículas separadas y ligeramente curvadas hacia
el lado ventral. La cabeza de la espícula es corta,
sobresale de la lámina por una constricción. El
gubernaculum tiene casi la mitad de tamaño que la espícula (Figura 1).
Figura 1.
Nematodo macho del género Heterorhabditis
La espícula tiene una coloración más clara, vista con
un campo claro a través del microscopio. La
bursa es pelodera y tiene nueve pares de papilas genitales, como se muestra en la Figura 2.
Mathios-Flores, M. A. et al. 5
Rev. Peru. Investig. Agropecu. 1(1): e9; (ene-jun, 2022)
Figura 2.
Nematodo macho del género Heterorhabditis. La bursa es pelodera con nueve pares de
papilas genitales
Hembras
Cabeza truncada ligeramente redondeada, con seis labios cónicos bien desarrollados,
separados y cada uno con una papilla terminal. La estoma es ancha, pero poco profunda, los
cheilorhabdiones están presentes y forman un
anillo, en una vista lateral se asemejan a dos
estructuras elongadas (Figura 3). El resto de la estoma
esta fusionado y forma una porción
colapsada posterior. La parte posterior de la estoma está rodeada del esófago, este no posee
metacorpus. El bulbo basal es ensanchado, la válvula basal es reducida, poco notoria. El anillo
nervioso está en el medio del istmo. El poro excretor usualmente esta posterior al final del
esófago.
Figura 3.
Nematodo hembra del género Heterorhabditis con seis labios cónicos
La cola es puntiaguda, más larga que ancho del cuerpo en la región anal, hay presencia de un
ensanchamiento postanal (Figuras 4 y 5).
6 Revista Peruana de Investigación Agropecuaria
Rev. Peru. Investig. Agropecu. 1(1): e9; (ene-jun, 2022)
Figura 4.
Nematodo hembra del género Heterorhabditis con una cola puntiaguda
Figura 5.
Nematodo hembra del género Heterorhabditis con cola puntiaguda
Juveniles infectivos
Heterorhabditis
Usualmente poseen una doble cutícula (Figura 6). En la parte anterior de la cutícula poseen
el patrón
tessellate (Figura 7) y estrías longitudinales a lo largo del cuerpo (Figura 8). La cabeza posee en
una parte anterior un diente dorsal prominente. La estoma luce como una cámara cerrada con
paredes paralelas (Figura 9). El esófago e intestino están reducidos.
Otra característica para Basilio
Agui (2018) es la cabeza que presenta una proyección pequeña en la porción dorsal y el poro excretor
localizado posteriormente al anillo nervioso. Los juveniles infectivos de
Heterorhabditis
son
hermafroditas
(Kaya & Stock, 1997).
Mathios-Flores, M. A. et al. 7
Rev. Peru. Investig. Agropecu. 1(1): e9; (ene-jun, 2022)
Figura 6.
Nematodo Juvenil infectivo
Figura 7.
Nematodo Juvenil
Figura 8.
Nematodo Juvenil infectivo. Estoma a manera de cámara
8 Revista Peruana de Investigación Agropecuaria
Rev. Peru. Investig. Agropecu. 1(1): e9; (ene-jun, 2022)
Figura 9.
Estrías longitudinales
3.2.
Género
Steinernema
Machos
El gubernaculum es largo (Figura 10), a veces tan largo como las espículas. La coloración del
gubernaculum y las espículas es más oscura que en
Heterorhabditis
. La
bursa está ausente. La
cola es redondeada, digitada y mucronada. Poseen pares
de papilas genitales (Figura 11).
Figura 10.
Género Steinernema
Mathios-Flores, M. A. et al. 9
Rev. Peru. Investig. Agropecu. 1(1): e9; (ene-jun, 2022)
Figura 11.
Papila genital
Hembras
El poro excretor se ubica antes del anillo nervioso. La cola es más larga o más corta que el
ancho del cuerpo en la región anal (Figura 12). Las colas de las hembras de
Steinernema
son
más cortas y cónicas que las colas del género
Heterorhabditis.
Figura 12.
Región anal del género Steinernema
CONCLUSIONES
La identificación de la especie usando solamente los descriptores para juveniles infectivos se
concluye que la especie es
Heterorhabditis
bacteriophora.
Las características morfológicas encontradas en los diferentes estadios de nematodos
entomopatógenos nativos coinciden con el género
Heterorhabditis
y
Steinernema
.
Este primer estudio de identificación de los nematodos entomopatógenos nativos en los diferentes
usos del suelo de Yurimaguas podría contribuir como propuesta para el control biológico de plagas
en los cultivos de importancia económica.
10 Revista Peruana de Investigación Agropecuaria
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FINANCIAMIENTO
El presente artículo se deriva del proyecto “Aislamiento e identificación de nematodos
entomopatógenos nativos en diferentes sistemas de uso del suelo en el distrito de Yurimaguas”,
aprobado y financiado por la UNAAA con Resolución de Comisión Organizadora N° 131-2021-
UNAAA/CO.
CONFLICTO DE INTERESES
No existe ningún tipo de conflicto de interés relacionado con la materia del trabajo.
CONTRIBUCIÓN DE AUTORÍA
Conceptualización: Mathios-Flores, M. A. y Pashanasi-Amasifuén, B.
Curación de datos: Aponte-Jaramillo, A. N., Alcázar-Sedano, J. G. y Saire-Quispe, L. A.
Análisis formal: Mathios-Flores, M. A. y Pashanasi-Amasifuén, B.
Investigación: Mathios-Flores, M. A., Pashanasi-Amasifuén, B., Aponte-Jaramillo, A. N., Alcázar-
Sedano, J. G. y Saire-Quispe, L. A.
Metodología: Mathios-Flores, M. A., Pashanasi-Amasifuén, B., Aponte-Jaramillo, A. N., Alcázar-
Sedano, J. G. y Saire-Quispe, L. A.
Supervisión: Mathios-Flores, M. A., Alcázar-Sedano, J. G. y Saire-Quispe, L. A.
Redacción-borrador original: Pashanasi-Amasifuén, B. y Aponte-Jaramillo, A. N.
Redacción-revisión y edición: Mathios-Flores, M. A.
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